OD başına hücre faktörü organizmaya ve cihaza özgüdür; kurulumunuz için kalibre edin.
Bu araç hakkında
OD600'den Hücre/mL Dönüştürücü, 600 nm'deki bir optik yoğunluk okumasını yaklaşık bir hücre konsantrasyonuna dönüştüren ücretsiz, tarayıcı içi bir araçtır. Bir organizma ön ayarını seçin veya kendi dönüşüm faktörünüzü girin, okuma sırasında kullanılan seyreltmeyi ekleyin; mililitre başına hücreyi ve bir kültür hacmi girerseniz toplam hücre sayısını bildirir. Her şey tarayıcınızda yerel olarak çalışır, hiçbir yükleme olmaz.
İlişki hücre/mL = OD₆₀₀ × faktör × seyreltme'dir. Faktör, bir OD birimine karşılık gelen mililitre başına hücredir — E. coli için kabaca 8 × 10⁸ ve tomurcuklanan maya için 3 × 10⁷ — ve seyreltme faktörü, seyreltilmiş bir örneğin okunmasını hesaba katar. Örneğin, seyreltilmemiş OD 1.0 okuyan bir E. coli kültürü yaklaşık 8 × 10⁸ hücre/mL'dir.
Ayrıca bir hedef OD girebilirsiniz; araç, kültürü o okumaya getirmek için gereken kat seyreltmesini geriye doğru hesaplar. Dönüşüm faktörü yalnızca yaklaşıktır ve organizmaya, büyüme fazına, küvet ışın yolu uzunluğuna ve spektrofotometreye büyük ölçüde bağlıdır, bu yüzden faktör alanı tamamen düzenlenebilir ve kendi cihazınız için kalibre edilmelidir.
Sık sorulan sorular
Formül nedir?
hücre/mL = OD₆₀₀ × faktör × seyreltme; burada faktör bir OD birimine eşit mililitre başına hücre sayısıdır ve seyreltme faktörü, seyreltilmiş bir örneğin okunmasını düzeltir. Bir kültür hacmiyle çarpmak toplam hücre sayısını verir.
Ön ayarlar hangi dönüşüm faktörlerini kullanır?
E. coli için OD başına yaklaşık 8 × 10⁸ hücre/mL ve Saccharomyces (tomurcuklanan maya) için 3 × 10⁷. Bunlar yalnızca tipik değerlerdir — doğruluk için Özel'i seçin ve kendi kalibre ettiğiniz faktörü girin.
Faktör neden yalnızca yaklaşık?
OD, doğrudan hücreleri değil ışık saçılımını ölçer, bu yüzden OD başına hücre oranı türe, hücre boyutuna ve şekline, büyüme fazına, kümelenmeye, küvet ışın yolu uzunluğuna ve spektrofotometreye bağlıdır. Güvenilir sayılar için plaka sayımlarına karşı kalibre edin.
Hedef-OD seyreltmesi nasıl çalışır?
Seyreltilmemiş eşdeğer optik yoğunluğu (okumanız çarpı seyreltme) alır ve o okumaya ulaşmak için kültürü seyreltmeniz gereken katı vermek üzere hedef OD'nize böler; bir alt kültür kurmak için kullanışlıdır.
Daha fazla araç