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Calculateur de masse moléculaire et de pI d'une protéine

Calculez la masse moléculaire d'une protéine en Da/kDa et son point isoélectrique (pI) à partir d'une séquence d'acides aminés à une lettre.

À propos de cet outil

Le calculateur de masse moléculaire et de pI d'une protéine est un outil gratuit, dans le navigateur, qui calcule la masse moléculaire et le point isoélectrique théorique d'une protéine ou d'un peptide à partir de sa séquence d'acides aminés à une lettre. Collez la séquence et il renvoie la masse en daltons et kilodaltons, la longueur en résidus, le pI estimé et la composition en acides aminés. Tout le calcul se fait localement dans votre navigateur et la séquence n'est jamais envoyée nulle part.

La masse moléculaire est la somme des 20 masses moyennes de résidus standard (par exemple Ala 71,08, Gly 57,05, Trp 186,21 Da) plus 18,02 Da d'eau pour les extrémités N- et C-terminales libres. Le point isoélectrique est trouvé en écrivant la charge nette en fonction du pH avec l'équation de Henderson–Hasselbalch sur les groupes ionisables — l'extrémité N-terminale, l'extrémité C-terminale, et les chaînes latérales d'Asp, Glu, Cys, Tyr, His, Lys et Arg — à l'aide des valeurs de pKa standard, puis en bissectant le pH entre 0 et 14 jusqu'à ce que la charge nette traverse zéro.

Les groupes positifs (N-terminal, His, Lys, Arg) contribuent 1/(1+10^(pH−pKa)) et les groupes négatifs (C-terminal, Asp, Glu, Cys, Tyr) contribuent −1/(1+10^(pKa−pH)). Le pI est une estimation théorique ; les valeurs réelles varient avec la température, la force ionique et les modifications post-traductionnelles, que cette méthode fondée sur la seule séquence ne modélise pas.

Foire aux questions

Comment la masse moléculaire est-elle calculée ?
Elle additionne les masses moyennes de résidus des 20 acides aminés de votre séquence et ajoute 18,02 Da pour l'eau terminale, donnant la masse moléculaire moyenne en daltons ; en divisant par 1000 on obtient les kilodaltons.
Comment le point isoélectrique est-il trouvé ?
La charge nette est écrite comme une somme de termes de Henderson–Hasselbalch sur les groupes ionisables à l'aide des valeurs de pKa standard, puis le pH est bissecté entre 0 et 14 pour trouver où la charge nette vaut zéro — ce pH est le pI.
Quels groupes influent sur le pI ?
Les extrémités N-terminale et C-terminale plus les chaînes latérales de l'aspartate (D), du glutamate (E), de la cystéine (C), de la tyrosine (Y), de l'histidine (H), de la lysine (K) et de l'arginine (R). Leurs effectifs et valeurs de pKa fixent l'endroit où la charge nette traverse zéro.
Quelle est la précision du pI estimé ?
C'est une valeur théorique issue de la seule séquence, généralement à quelques dixièmes d'unité de pH des valeurs mesurées. Elle ignore la structure 3D, les modifications, la température et la force ionique, à traiter donc comme un repère.

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